ก่อนใช้ เข็มฉีดยาอินซูลิน , ผู้ป่วยควรล้างมือ, ตรวจชนิดของอินซูลินและขนาดฉีด, ดูดอากาศในกระบอกฉีดยา, เลือกส่วนที่มีไขมันใต้ผิวหนังมากขึ้น เช่น ช่องท้องทั้งสองข้าง, ส่วนบนด้านนอกของต้นขา, ฯลฯ และฆ่าเชื้อผิวหนังด้วยสำลีแอลกอฮอล์ หลังจากแอลกอฮอล์แห้งแล้ว ให้ใช้นิ้วโป้ง นิ้วชี้ และนิ้วกลางบีบผิวหนังที่ฉีด สอดเข็มขนาด 4 มม. ในแนวตั้ง และฉีดเข็มขนาด 6 มม. ที่มุม 45° , ดันยาเหลว ค้างไว้สักครู่ แล้วค่อยๆ ดึงเข็มออก ใช้สำลีกด ไม่ต้องนวดบริเวณที่ฉีด ควรสังเกตว่าเมื่อฉีดอินซูลินบริเวณที่ฉีดจะต้องหมุนบ่อย ๆ และระยะห่างระหว่างจุดฉีดแต่ละจุดควรมากกว่า 1 ซม. เพื่อหลีกเลี่ยงการฉีดซ้ำที่จุดเดียวกันมิฉะนั้นจะนำไปสู่การฝ่อของไขมันใต้ผิวหนังหรือ hyperplasia ซึ่งจะส่งผลต่อการดูดซึมอินซูลิน นอกจากนี้ หลีกเลี่ยงการเช็ดปลายเข็มด้วยรีเอเจนต์ที่มีแอลกอฮอล์ แอลกอฮอล์จะลอกการเคลือบปลายเข็ม ทำให้แกนเข็มหยาบ และเพิ่มความเจ็บปวดระหว่างการฉีด

สำหรับอินซูลินที่ไม่ได้เปิด สามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องในที่แห้งและเย็นที่อุณหภูมิต่ำกว่า 25 องศาเซลเซียส หลีกเลี่ยงแสงและความร้อน อายุการเก็บรักษาของอินซูลินที่เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องหลังจากเปิดโดยทั่วไปจะไม่เกิน 4 สัปดาห์ หากอินซูลินไม่ได้เปิดออกและจะไม่ถูกใช้ในระยะเวลาอันสั้น แนะนำให้เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ 2-8 องศาเซลเซียส และไม่ควรแช่ในช่องแช่แข็ง อย่าวางไว้ในตู้เย็นใกล้กับผนังของตู้เย็น มิฉะนั้น อินซูลินอาจถูกทำลายเนื่องจากการแช่แข็ง อย่าวางไว้ใกล้ประตูตู้เย็น การเปิดและปิดประตูตู้เย็นซ้ำๆ จะทำให้อินซูลินสั่นสะเทือนซ้ำๆ ซึ่งจะส่งผลต่อระดับอินซูลินและลดฤทธิ์ลดน้ำตาลในเลือดได้